以下這些Waters液相色譜柱的選擇方法你一定要記住
更新時間：2019-12-26 點擊次數：3019次
Waters液相色譜柱的選擇方法概述：
1、填料的種類：
填料的基質一般選擇使用多孔硅膠或聚合物等，在細孔的表面有多種經過化學修飾的官能團。
利用目標成分疏水性的不同起到分離效果的反相分離模式，利用極性不同進行分離的正相分離模式，根據分子大小的不同而分離的尺寸排阻模式，根據離子性質的不同而達到分離的離子交換模式，又或者分離光學異構體等，根據目的的不同，需要選擇對應的填料。
作為填充劑的代表十八烷基、辛基、丁基等即在硅膠的細孔表面化學鍵合的C18（ODS）、C8或C4等，碳鏈越長，疏水性越強。
2、填料孔徑：
多孔硅膠為基體的填料表面具有無數的細孔，需要根據目的成分的分子量選擇對應大小的填料孔徑。微孔徑100?（10nm）對應5000左右的分子量。分子量大于5000的，可以選擇300?（30nm）或以上的大孔徑柱子。目的成分能夠進入孔的話，才能與官能團相互作用從而起到分離的效果。對于大分子蛋白質或聚合物等高分子，如果不是大孔徑的基體，與官能團的相互作用就會減少。另外，分析低分子時，選擇太大的微孔，由于會擴散故導致峰型可能會展寬。
一般通用的HPLC柱內徑為4.6mm，LC/MS內徑多為2.1mm，毛細管HPLC色譜柱為不滿1mm，制備HPLC色譜柱6.0mm以上。通用HPLC系列，內徑不同得到的結果也不同。即使改變內徑，根據色譜柱的截面積比改變相應的流速，保留時間基本不會改變。特別是對于像UV、RI一樣對于濃度要求很高的檢測器而言，流速越小，其對應的靈敏度也越高。需要注意的是，通用型HPLC色譜柱內徑太小，裝置的死體積影響變大，峰型會變寬。并且根據HPLC系統使用目的的不同種類也不同，能夠設定的正確的流速與流速范圍，系統響應等也會不同，所以根據系統不同選擇對應的內徑是十分重要的。
4、Waters液相色譜柱尺寸（長度）：
一般使用較多的色譜柱的長度，通用型，制備HPLC柱長度為150～250mm，LC/MS為100-150mm，超快速HPLC（UHPLC）為50-100mm。Waters液相色譜柱長度越長理論塔板數也越高。只是，需要注意，色譜柱長度加倍后，分析時間與使用壓力也會加倍。對于2μm或者3μm的微粒子，分離度和理論塔板數都較好時，將色譜柱的長度變短，可以縮短分析時間，進行快速分析。
5、接頭形式：
Waters液相色譜柱的接頭根據廠家的不同也會有不同。一般分析色譜柱是1/16英寸外徑的管子使用螺絲進行連接，若連接不同的接口，較易產生死體積與漏液現象。
特別對于不銹鋼的配管等，需用套圈固定管子，就必須選擇對應的接口形式。
接口形式和螺距有英寸螺距和毫米螺距兩種。一般Waters接口型使用比較普遍。無論是HPLC或UHPLC，通過選擇適當的色譜柱接口形式，InertSustain以及Inertsil的性能能夠充分的發揮。
在線咨詢